基因分析揭示了围绕乔治·华盛顿总统的弟弟塞缪尔及其亲属命运的长期谜团。塞缪尔的两个后代和他们的母亲最近从19世纪80年代的无标记墓葬中发现的骨骼遗骸中被确认。这项调查还提供了首任美国总统的首份父系DNA图谱，他自己没有孩子。
研究人员通过几种类型的DNA分析确定了关键的祖先细节，包括一种新技术，该技术分析了成千上万的基因组数据点，称为单核苷酸多态性，或SNPs，这是基因序列的变化，只影响一个核苷酸，DNA的组成部分。
另一个关键成分是塞缪尔·华盛顿在世后裔的DNA。研究人员周四在《科学》(iScience)杂志上报告说，通过将这名后代的原始DNA与骨头碎片中已有数百年历史的退化DNA进行比较，科学家们发现了华盛顿家族久违的身份和联系的线索。
高级研究作者、分子人类学家、美国国防部DNA行动部副主任查拉·马歇尔在一封电子邮件中说:“这些方法的多样性使我们能够揭示19世纪中期身份不明的人类遗骸与与祖先隔了几代的活着的后代之间的关系。”
根据这项研究，这些技术还可以帮助识别那些在军队服役的人的未知遗骸，这些遗骸可以追溯到第二次世界大战。
塞缪尔·华盛顿比乔治小两岁多，于1781年去世，被葬在西弗吉尼亚州查尔斯镇附近的哈伍德庄园的墓地里。研究报告的主要作者、美国武装部队DNA鉴定实验室的研究科学家考特尼·l·卡瓦格尼诺说，记录显示，哈伍德公墓埋葬着华盛顿家族的20名成员，“包括塞缪尔·华盛顿和他的两个妻子、他们的孩子、孙子和曾孙等。”
卡瓦格尼诺在一封电子邮件中告诉CNN，与埋葬在弗吉尼亚州弗农山一座宏伟的大理石坟墓中的乔治·华盛顿不同，塞缪尔的坟墓没有标记，可能是为了保护它免受盗墓者的伤害。其他坟墓也没有墓碑，使得现代历史学家无法确定谁被埋在哪里。
1999年，为了寻找塞缪尔·华盛顿的安息之地，研究人员在墓地挖掘了五个没有标记的坟墓。他们从三次埋葬中找到了小骨头和牙齿，但当时的DNA测试没有定论，因为样本严重降解并被细菌污染。
对于这项新研究的作者来说，幸运的是，“自21世纪初以来，DNA分析已经取得了长足的进步，”卡瓦格尼诺说。他们结合了从遗骸中优化受损DNA短链的技术，使他们能够提取所需的遗传物质。母亲的关系是通过线粒体DNA测序确定的，而父亲的关系是通过观察Y染色体发现的。进一步的细节来自95,000个snp，这是针对常染色体DNA(不附着在性染色体上的DNA)的大量数据。
基因数据首先确定了遗骸是一名妇女和她的两个儿子;记录进一步表明，这名女子是露辛达·“露西”·佩恩，而这两名男子是塞缪尔的孙子(以及乔治的侄孙):小乔治·斯特普托·华盛顿和塞缪尔·沃尔特·华盛顿博士。这位在世的后代的DNA与塞缪尔·沃尔特·华盛顿博士的DNA更接近。
科学家们说，这些数据不仅证明了这位已故医生是华盛顿在世的曾曾祖父，还显示了哪个遗体属于哪个兄弟。否则，这是不可能确定的。
1882年，几个人的遗体从哈尔伍德被挖出，并被移到查尔斯镇锡安圣公会教堂的坟墓里。露西·佩恩和她的儿子们也在其中。但他们的一些骨头被留下了;到1999年发掘出来的时候，已经不清楚它们属于谁了。如今，近150年过去了，这些遗骸的身份终于得到了确认。
佛罗里达大学(University of Florida)人类学系教授、遗传学和基因组学研究生项目协调员康妮·j·穆里根(Connie J. Mulligan)说:“将已故和活着的亲属结合起来，使这项研究成为一个美妙的谜题，你必须努力工作才能弄清楚，但你已经掌握了所有必要的部分。”Mulligan研究基因变异，以了解DNA如何影响健康和疾病，他没有参与这项研究。
活着的后代塞缪尔·沃尔特·华盛顿(Samuel Walter Washington)是哈伍德庄园的现任所有者，结果发现他与两位已故兄弟的DNA共同点比研究人员预期的要多。他们将这一现象归因于华盛顿家谱中多个跨表亲婚姻导致的谱系崩溃——亲戚之间的婚姻缩短了祖先的数量。
穆利根在接受CNN采访时表示:“跨表亲婚姻只影响了兄弟之间的亲属关系，而对嫁入这个家族的母亲没有影响。”“我不知道有任何研究的数据集像这个研究一样酷，谱系的复杂性，所以你可以使用经验数据来测试相互关系是如何改变亲属关系的估计的。”她补充说，这项研究“是尖端科学和伟大侦探工作的结合!”
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马歇尔说，研究人员的分析还得出了乔治·华盛顿的第一个y染色体DNA图谱，因为研究中的男性——活着的和去世的——“都是乔治·华盛顿的父亲奥古斯丁·华盛顿的直系后代”。这项研究的作者写道，这项研究可以澄清那些继承了华盛顿姓氏的人之间的家谱关系，但不确定他们的家庭关系，“以确定谁与乔治·华盛顿本人有父系关系”。
但是，尽管这些发现提供了许多新的见解，1999年开始挖掘的问题仍然存在:乔治的兄弟被埋在哪里?马歇尔说，塞缪尔的坟墓还没有被发现，他的任何遗骸也没有被确认。在这一点上，她补充说，他的下落可能永远消失了。
马歇尔说:“寻找塞缪尔·华盛顿坟墓的工作已经停止。”“很可能他的坟墓很久以前就被挖出来了，也许再也找不到了。”
